Fluorescein diacetate (FDA) یک ترکیب شیمیایی فلورسانس است که به‌طور گسترده در علوم زیستی و تحقیقات بیوتکنولوژی استفاده می‌شود. این ماده به‌عنوان یک نشانگر زنده‌مانی سلولی، سنجش فعالیت آنزیمی و بررسی سمیت سلولی به کار می‌رود.
کاربردها
تشخیص زنده‌مانی سلول‌ها: FDA یک مولکول غیر فلورسانس است که در سلول‌های زنده توسط آنزیم‌های استراز هیدرولیز شده و به فلوروسئین فلورسانس تبدیل می‌شود. این خاصیت امکان تفکیک سلول‌های زنده از سلول‌های مرده را فراهم می‌کند.
سنجش فعالیت آنزیمی: FDA به‌عنوان یک سوبسترا برای آنزیم‌های هیدرولیتیک، مانند استرازها و لیپازها استفاده می‌شود. فعالیت این آنزیم‌ها با افزایش سیگنال فلورسانس مشخص می‌شود.
ارزیابی سمیت سلولی (سیتوتوکسیکیت): در مطالعات دارویی و تحقیقات زیستی، FDA برای بررسی اثر داروها و مواد شیمیایی بر زنده‌مانی سلول‌ها به کار می‌رود.
استفاده در میکروسکوپی فلورسانس: FDA در آزمایش‌های تصویربرداری فلورسانس برای بررسی ساختار و عملکرد سلول‌های زنده در زمان واقعی استفاده می‌شود.
کاربردهای پزشکی و داروسازی: FDA در تحقیقات پزشکی، به‌ویژه در بررسی تاثیر داروها و ارزیابی ترکیبات زیست‌فعال بر سلول‌های زنده کاربرد دارد.
نحوه استفاده از Fluorescein Diacetate
روش آزمایش: مقدار مشخصی از FDA به محیط کشت سلولی اضافه شده و پس از مدت‌زمان مشخصی (چند دقیقه تا چند ساعت)، سیگنال فلورسانس آن توسط میکروسکوپ یا دستگاه فلورومتری بررسی می‌شود.
شرایط نگهداری: FDA معمولاً در محلول‌های آلی مانند DMSO حل شده و در دمای پایین (معمولاً منهای 20 درجه سانتی‌گراد) نگهداری می‌شود تا پایداری آن حفظ شود.
جمع‌بندی
Fluorescein Diacetate (FDA) یک ابزار قدرتمند در زیست‌شناسی سلولی و بیوتکنولوژی است که به‌طور گسترده در تشخیص زنده‌مانی سلول‌ها، سنجش فعالیت آنزیمی، ارزیابی سمیت و تصویربرداری فلورسانس به کار می‌رود. به دلیل حساسیت بالا و قابلیت استفاده آسان، این ماده یکی از گزینه‌های اصلی در تحقیقات زیستی و پزشکی محسوب می‌شود.
