معرفی محصول Ni Seplife® 6FF (NTA) Nickel Chelating Agarose Chromatography Resin
رزین Ni Seplife® 6FF (NTA) نسل جدیدی از بسترهای کروماتوگرافی تمایلی (Ni-NTA Affinity Chromatography Resin) است که با بهرهگیری از فناوری 6FF Agarose و گروههای NTA (نیتریلوتریاستیک اسید) طراحی شده و با یونهای نیکل (Ni²⁺) فعالسازی میشود. این ترکیب ساختاری موجب ایجاد سایتیهای اتصال قوی و اختصاصی برای پروتئینهای دارای تگ هیستیدین (His-tag) میگردد که در فرآیندهای خالصسازی پروتئین، پپتید و اسید نوکلئیک در صنایع زیستداروسازی (Biopharmaceutical) و زیستفناوری (Bioengineering) کاربرد فراوان دارد.
این رزین بهدلیل ساختار سهبعدی پایدار آگارز و درصد بهینه تخلخل، جریاندهی بالایی در ستونهای کروماتوگرافی فراهم کرده و امکان جداسازی دقیق، با بازیابی بالا و افت فشار بسیار کم را مهیا میسازد. توزیع یکنواخت اندازه ذرات در محدوده 45–165 µm موجب میشود Ni Seplife® 6FF (NTA) عملکردی ثابت و قابل پیشبینی در فرآیندهای صنعتی و تحقیقاتی ارائه دهد.
رزین Ni-NTA Seplife® بهصورت گسترده در سیستمهای FPLC و سایر پلتفرمهای خالصسازی اتوماتیک برای جداسازی پروتئینهای نوترکیب، آنزیمها، و مولکولهای دارای گروههای ایمیدازول قابل استفاده است. این رزین دارای پایداری شیمیایی و فیزیکی بالا در بازه pH 3–13 بوده و با محلولهای شوینده و احیاکننده متداول مانند NaOH و HCl سازگار است.
در مجموع، Ni Seplife® 6FF (NTA) Nickel Chelating Agarose Chromatography Resin انتخابی ایدهآل برای محققان و صنایعی است که بهدنبال رزینی با ظرفیت اتصال بالا، دوام طولانی، عملکرد پایدار و خلوص خروجی عالی برای پروتئینهای نوترکیب دارای His-tag هستند. این محصول ترکیبی از کیفیت صنعتی، تکرارپذیری بالا و سهولت استفاده را در فرآیندهای کروماتوگرافی ارائه میدهد.
جدول مشخصات رزین Ni Seplife® 6FF (NTA) Nickel Chelating Agarose Chromatography Resin
مشخصات فیزیکی و شیمیایی رزین Ni Seplife® 6FF (NTA) شامل ساختار ماتریس، اندازه ذرات، ظرفیت اتصال یونی، پایداری شیمیایی و بازه pH، فشار کاری و ویژگیهای کلیدی در جدول زیر آورده شده است.
| ویژگی | Ni Seplife® 6FF (NTA) Nickel Chelating Agarose Chromatography Resin |
|---|---|
| کد رزین | Ni Seplife® 6FF (NTA) |
| ساختار ماتریس | Seplife® 6FF cross-linked agarose |
| ظاهر | دانههای کروی ژلی (Sphere gel beads) |
| اندازه ذرات (µm) | 45–165 |
| دبی جریان (cm/h) | ≥370 |
| فشار کاری (MPa) | 0.3 |
| ظرفیت اتصال یونی (Ni2+ μmol/ml) | ≈15 |
| پایداری pH | 3–13 (بلندمدت)، 2–14 (کوتاهمدت، CIP) |
| کاربرد | تصفیه و خالصسازی پروتئینهای نوترکیب دارای His-tag در فرآیندهای زیستداروسازی و زیستفناوری |
| پایداری شیمیایی |
|
آمادهسازی ستون (Column Packing)
تمام مواد و بافرهای مورد نیاز باید در دمای اتاق آماده شوند. ابتدا محلولهای بافر اولیه و بافر شوینده (Elution Buffer) را تهیه کنید. سپس رزین را مطابق حجم ستون انتخاب کرده و با حذف اتانول 20% خشک نمایید. رزین را با نسبت 3:1 (رزین به بافر) به حالت یکنواخت (Homogenate) درآورده و هواگیری (Degassing) انجام دهید. داخل ستون باید با آب یا بافر مرطوب باشد، بهطوری که سطح مایع بالاتر از فیلتر قرار گیرد و هیچ حبابی در کف وجود نداشته باشد. رزین همگن را بهآرامی با میله شیشهای در امتداد دیواره داخلی ستون بریزید تا از تشکیل حباب جلوگیری شود. پس از تهنشینی رزین، درپوش ستون را ببندید و بافر را با دبی حدود 1.33× سرعت جریان معمول از ستون عبور دهید تا تعادل اولیه برقرار گردد (حدود 2–3 BV بافر).
تعادل ستون (Equilibrium)
ستون را با 2–5 حجم بستر (Bed Volume) از بافر اولیه شستشو دهید تا هدایت الکتریکی، pH و سایر پارامترها ثابت بمانند.
بارگذاری نمونه (Sample Loading)
- نمونه باید در بافر اولیه با محدوده pH بین 6–8 حل شود. افزایش pH معمولاً موجب افزایش ظرفیت اتصال میشود.
- بافر نباید حاوی EDTA یا سیترات باشد و توصیه میشود از عوامل کاهنده مانند β-مرکاپتواتانول و DTT استفاده نشود.
- بافرهای رایج شامل محلول فسفات سدیم 10–100 mmol/L یا بافر Tris-HCl 20–200 mmol/L هستند.
- معمولاً 0.15–0.5 mol/L NaCl به بافر افزوده میشود تا تبادل یونی کاهش یابد.
- برای استفاده اولیه از ژل آگارز نیکل، پیشنهاد میشود از 50 mmol/L PBS (حاوی 50 mmol/L NaH₂PO₄ و 0.5 mol/L NaCl، با pH 7.4) بهعنوان بافر اولیه استفاده شود.
شویش (Elution)
فرآیند شویش بهصورت کلی با سه روش زیر انجام میشود:
- شویش با کاهش pH: بیشتر پروتئینها در محدوده pH 6–4 یا حتی 3–4 جدا میشوند. بافرهای مناسب شامل استات سدیم، اسید سیتریک و فسفات هستند.
- شویش رقابتی: با افزایش خطی یا مرحلهای غلظت مواد دارای تمایل به یونهای فلزی مانند 0–0.5 mol/L ایمیدازول، 0–50 mmol/L هیستیدین یا 0–2 mol/L NH₄Cl انجام میشود.
- شویش با عامل کمپلکسکننده: ترکیباتی مانند EDTA یا EGTA با یونهای فلزی واکنش داده و باعث آزاد شدن پروتئین میشوند. این روش برای جداسازی انتخابی مناسب نیست و ممکن است جذب پروتئینها را مختل کند.
توضیحات تکمیلی (Remarks)
- در صورت نامشخص بودن غلظت ایمیدازول مورد نیاز، توصیه میشود غلظتهای 10, 20, 50, 100, 200, 500 mmol/L در بافر اولیه تست شوند و نتیجه با SDS-PAGE ارزیابی گردد.
- ایمیدازول خاصیت قلیایی دارد؛ پس از تهیه بافر، pH آن را با HCl تنظیم کنید.
- شویش با pH پایین یا با عوامل کمپلکسساز موجب افت یونهای فلزی میشود؛ بنابراین پیش از استفاده مجدد، ستون باید دوباره یوندهی شود.
- در شرایط مناسب میتوان شویش گرادیانی ایمیدازول انجام داد تا شرایط بهینه تعیین گردد.
- در تمام روشهای شویش، باید 150–500 mmol/L NaCl به بافر افزوده شود تا تبادل یونی حذف گردد.
بازسازی رزین (Regeneration)
- پس از چند بار استفاده یا در صورت نیاز به تعویض یون نیکل، باید ستون بازسازی شود. ابتدا ستون را با 5–10 BV آب مقطر و سپس 5–10 BV از محلول 100 mmol/L EDTA شستشو دهید و در نهایت با 2–3 BV از محلول 0.5 mol/L NaCl باقیمانده EDTA را حذف کنید.
- برای تمیز کردن ستون، از محلول 0.1–1.0 mol/L NaOH در جریان 50 cm/h به مدت 1–2 h استفاده کنید تا ناخالصیها و اندوتوکسینها حذف شوند.
- برای بازکمپلکسسازی فلز، ستون تمیزشده را با 2–5 BV آب مقطر شسته و سپس 0.1–0.3 mol/L محلول نمک فلزی را به مقدار 5–10 BV عبور دهید. سپس با آب مقطر اضافی شستشو دهید تا یونهای آزاد حذف شوند.
CIP (تمیزکاری در محل)
- برای حذف پروتئینهای متصلشده با تبادل یونی، ستون را با 2–3 BV محلول 2 mol/L NaCl شستشو دهید.
- برای حذف پروتئینها و لیپیدهای هیدروفوب قوی، از 70% اتانول یا 30% ایزوپروپانول استفاده کنید (به میزان 4 BV).
- برای حذف پروتئینهای رسوبکرده، از مراحل بازسازی رزین پیروی کنید.
نگهداری (Storage)
رزین باید در شرایط خشک، تمیز و دارای تهویه مناسب در دمای 4–30°C و در محلول حاوی 20% اتانول نگهداری شود. ستونهای استفادهشده باید در دمای 4–8°C و در همان محلول اتانولی ذخیره شوند. از یخزدگی رزین جلوگیری کنید.
هشدارها (Caution)
- نمونه و رزین Ni Seplife® 6FF (NTA) باید پیش از ورود به ستون با بافر شوینده تعادل داده شوند.
- بستر ستون باید صاف و بدون حفره یا حباب باشد؛ در غیر این صورت باید مجدداً بستهبندی شود.
- در هنگام استفاده، دمای بافر و ستون باید یکسان باشد تا از تشکیل حباب جلوگیری شود.
- دبی جریان در فرآیند شویش باید کنترلشده و ثابت باشد.
- در حین بارگذاری و کل فرآیند شویش، سطح رزین نباید خشک شود.
آشنایی با Sunresin
Sunresin یکی از شرکتهای پیشرو در حوزه مواد جاذب و فناوریهای جداسازی تخصصی است که راهکارهای یکپارچه «مواد + تجهیزات» را ارائه میدهد. این شرکت فعالیت خود را از سال 2001 آغاز کرده و با تکیه بر نوآوری و توسعه فناوریهای پیشرفته، خدمات و محصولات خود را در زمینههای مختلف از جمله فلزات، علوم زیستی، تصفیه آب، صنایع غذایی و کاتالیز شیمیایی ارائه میکند.
مرکز اصلی Sunresin در شیآن چین قرار دارد و محصولات آن در بازارهای بینالمللی مورد استفاده قرار میگیرند. کیفیت ممتاز، نوآوری مستمر و توانایی ارائه راهکارهای تخصصی، از مهمترین ویژگیهایی هستند که این شرکت را به نامی معتبر در صنعت تبدیل کردهاند.
رزینهای تخصصی Sunresin
 |
ما در BMG Biotech با همکاری برند معتبر Sunresin، انواع رزینهای تخصصی و تجهیزات جداسازی و جاذب را با بالاترین استانداردهای جهانی ارائه میدهیم.
از جمله مهمترین مزایای ارائه رزینهای Sunresin توسط BMG میتوان به «فناوری پیشرفته تولید رزین»، «کیفیت بالا»، «عملکرد بهینه در کاربردهای فلزات، علوم زیستی، تصفیه آب و صنایع غذایی»، «پشتیبانی تخصصی» و «تحویل سریع به سراسر ایران» اشاره کرد. |
سایر محصولات Sunresin
مزیتهای ما
تمایز در کیفیت و قیمت
دقیقترین و سریعترین سرویس
کارشناسان بینالمللی
امکانات نوین و فناوریهای پیشرفته
رویکرد تخصصی
حضور پژوهشگران بیوتکنولوژی
گواهینامهها
گواهی اصالت از شرکت Sunresin
