RevertAid First Strand cDNA Synthesis Kit

Lot Number: 3223414 | Cat Number: K1622 | No. of Reactions: 100

Thermo_Fisher

دسترسی: موجود

- +

86,400,000 تومان 42,000,000 تومان
51% تخفیف!

شناسه خدمت: cDNA Synthesis Kit دسته:
  • کنترل کیفیت توسط کارشناسان بین‌المللی
  • ضمانت «اصالت» تمامی خدمات و محصولات
  • قیمت منصفانه با منشور حقوق مصرف‌کنندگان BMG
  • صرفه‌جویی در زمان شما با انجام فرایندهای سیستماتیک
با خیال راحت از BMG Biotech خرید کنید!
  • پشتیبانی
  • نماد اعتماد الکترونیکی
  • پرداخت کارت به کارت
  • behparddakht
  • ssl secured

Thermo Scientific™ RevertAid First Strand cDNA Synthesis Kit

کیت کامل و قابل اتکا برای سنتز cDNA رشته اول از نمونه‌های RNA با توانایی تولید cDNA تا ~13 kb. شامل RevertAid Reverse Transcriptase و RiboLock RNase Inhibitor برای محافظت از RNA. مناسب برای RT-PCR  / RT-qPCR و ساخت کتابخانه‌های cDNA.

چکیده مشخصات (Specifications)

نوع محصول (Final Product Type) First-Strand cDNA
فرمت (Format) Kit
تعداد واکنش (No. of Reactions) 100 Reactions
دمای بهینه واکنش (Optimal Reaction Temperature) 42°C
فعالیت Ribonuclease H Yes
اندازه (Size) تا 13 kb (Full-length cDNA)
مواد اولیه (Starting Material) RNA
کاربرد (For Use With) RT-PCR, RT-qPCR
سرعت واکنش (Reaction Speed) ~60 min
حالت ارسال (Shipping Condition) Dry Ice

محتویات کیت

  • RevertAid Reverse Transcriptase (M-MuLV recombinant RT)
  • RiboLock RNase Inhibitor
  • Oligo(dT)18 primer و Random Hexamer primers
  • Bufferها و نوکلئوتیدهای لازم برای واکنش RT
  • راهنمای کاربری و پروتکل‌های نمونه

ویژگی‌های کلیدی (Key Features)

  • تولید cDNA رشته اول تا طول کامل: تا 13 kb.
  • دمای بهینه کارکرد RT: 42°C (قابل استفاده تا 50°C برای نمونه‌های با ساختار ثانویه قوی).
  • حضور RiboLock RNase Inhibitor برای محافظت مؤثر از RNA تا دماهای بالا (تا 55°C).
  • شامل هر دو پرایمر oligo(dT)18 و random hexamers؛ مناسب برای mRNA و RNA های فاقد poly(A) مانند miRNA.
  • امکان وارد کردن نوکلئوتیدهای برچسب‌دار رادیواکتیو یا غیررادیواکتیو جهت تهیه پروب برای هیبریداسیون و میکرواری‌ها.
  • کیت کامل با همه مؤلفه‌های لازم برای واکنش RT.

کاربردها (Applications)

  • سنتز cDNA رشته اول برای RT-PCR و RT-qPCR
  • ساخت لایبرری‌های cDNA تمام‌قد (full-length)
  • سنتز RNA آنتیسنس
  • آماده‌سازی پروب‌ها برای هیبریداسیون و میکرواری

نسخه‌های موجود و اطلاعات بسته‌بندی

نسخه استاندارد: 100 Reactions. در صورت نیاز به درج اطلاعات دقیق نسخه 5 mL که در اختیار دارید، می‌توان مشخصات بسته‌بندی و SKU اختصاصی آن را اضافه نمود.

  • سریع، قابل اعتماد و مناسب برای سنتز cDNA طولانی (تا 13 kb).
  • شامل محافظ RNase و تمام اجزای لازم برای واکنش RT.
  • پشتیبانی از پرایمرهای متنوع: oligo(dT)18, random hexamers یا پرایمرهای ژن-خاص.

سؤالات متداول (FAQ)

آیا می‌توان از این کیت برای miRNA استفاده کرد؟
برای miRNA معمولاً از روش‌ها و پرایمرهای اختصاصی کوتاه‌تر استفاده می‌شود؛ random hexamers در برخی موارد قابل استفاده است اما برای miRNA بهتر است از کیت‌های تخصصی miRNA استفاده شود.
آیا می‌توان از این cDNA در qPCR استفاده کرد؟
بله؛ cDNA تولیدشده مناسب RT-qPCR است؛ پیشنهاد می‌شود واکنش‌های کنترل و استانداردهای کمی‌سازی را اجرا کنید.
آیا می‌توان نوکلئوتیدهای برچسب‌دار در واکنش وارد کرد؟
بله؛ امکان وارد کردن نوکلئوتیدهای رادیواکتیو یا غیررادیواکتیو برای تولید پروب وجود دارد (مطابق دستورالعمل‌های ایمنی و پروتکل‌های آزمایشگاه).

احتیاط

فقط برای استفاده تحقیقاتی کاربرد دارد و برای فرایندهای تشخیصی مناسب نیست.

خلاصه پروتکل (Quick Protocol Overview)

  1. آماده‌سازی RNA با کیفیت و حذف DNA ژنومی (DNase treatment در صورت نیاز).
  2. انتخاب پرایمر مناسب: oligo(dT)18 برای mRNA؛ random hexamers برای توالی‌های فاقد poly(A) یا مناطق 5’؛ یا پرایمر مخصوص ژن.
  3. آمیزه‌سازی RNA و پرایمر، دناتوراسیون کوتاه و آنیلینگ بر طبق پروتکل سازنده.
  4. افزودن buffer، dNTP و RiboLock و در نهایت RevertAid RT؛ انکوباسیون در دمای ~42°C به مدت ~60 دقیقه.
  5. توقف واکنش و استفاده از cDNA تولیدشده در RT-PCR یا ذخیره در منهای 20 تا منهای 80 درجه سانتیگراد

نکات کاربردی و توصیه‌ها (Practical Tips)

  • کیفیت RNA کلید موفقیت است: از RNA با نسبت A260/A280 مناسب و بدون آلودگی استفاده کنید.
  • در صورت وجود ساختار ثانویه قوی در RNA، دمای بالاتر (تا 50°C) ممکن است بازده را افزایش دهد.
  • برای سنتز cDNA از RNA‌های کم‌مقدار، از random hexamers یا روش‌های افزایش حساسیت استفاده کنید.
  • همیشه از کنترل منفی (بدون RT) جهت بررسی آلودگی DNA ژنومی استفاده کنید.
cDNA Figure
در این آزمایش، 1 میکروگرم RNA کل قلب موش برای انجام واکنش رونویسی معکوس با استفاده از پرایمر oligo(dT)18 به کار گرفته شد. cDNA سنتز شده به‌عنوان قالب در واکنش‌های PCR بعدی با استفاده از DNA پلی‌مراز Taq مورد استفاده قرار گرفت. توانایی تقویت قطعه نهایی 2024 جفت باز نشان می‌دهد که کل توالی RNA به طول 13.8 کیلوباز به صورت معکوس رونویسی شده است.

کارشناسان BMG از مراحل اولیه تا پروسۀ اجرایی و تحویل نهایی در کنار شما هستند.

سبد خرید
پیمایش به بالا