Synthetic CRISPR sgRNA

ویرایش ژن با فناوری پیشرفته GenScript، زمانی برای تغییر و تصحیح؛ آینده را از امروز بازنویسی کنید!

Synthetic CRISPR sgRNA چیست؟

در ویرایش ژنومی مبتنی بر CRISPR، دقت و بازدهی بالا نقشی کلیدی دارند. sgRNA سنتتیک (Synthetic single guide RNA) که با استفاده از فناوری‌های پیشرفته به‌صورت شیمیایی سنتز می‌شود، راهکاری ساده و مقرون‌به‌صرفه برای افزایش کارایی این سیستم است. این مولکول در مقایسه با sgRNA تولیدشده به روش رونویسی درون‌سلولی (IVT sgRNA)، بازدهی ویرایش بالاتری دارد، سمیت کمتری برای سلول‌ها ایجاد می‌کند و از پایداری بیشتری در محیط‌های مختلف آزمایشگاهی برخوردار است.

مطالعات نشان داده‌اند که GenCRISPR synthetic sgRNAs عملکرد موثری در ویرایش ژن‌های هدف، به‌ویژه در آزمایش‌های Knockout و واردسازی هدفمند (Knock-in) با واسطه HDR دارند. ترکیب sgRNA با پروتئین Cas9 در قالب یک مجموعه ribonucleoprotein (RNP)، در مقایسه با روش‌های مبتنی بر پلاسمید یا ویروس، مزایای متعددی دارد؛ از جمله کاهش واکنش ایمنی (immunogenicity)، افزایش دقت و کاهش اثرات خارج از هدف (off-target effects) و افزایش بازدهی در انواع مختلف سلول‌ها.

علاوه بر این، ما امکان سنتز سفارشی pegRNA را برای ویرایش اولیه (prime editing) و crRNA را برای سیستم‌های ویرایش Cpf1/Cas12a فراهم کرده‌ایم. این رویکردهای پیشرفته، دقت و انعطاف‌پذیری بیشتری را برای ویرایش ژنومی فراهم می‌کنند و کاربردهای متعددی در زمینه‌های تحقیقاتی، درمانی و بیوتکنولوژی دارند.

ابزار طراحی

HDR knock-in template design tool
  • Supports 1-1500bp deletions, 1bp-20kb insertions
  • Linear ssDNA / linear closed-end dsDNA / circular dsDNA formats available
  • CTS option and updated on-target and off-target scores increase editing efficiency
  • Multiple sequence check function helps avoid mistakes
  • sgRNA design tool
  • Comprehensive species options, updated on-target and off-target scores
  • Designs target early exons to avoid truncated functional proteins
  • Higher transcript coverage
  • Ideal GC% for sgRNA
  • Validated KO% up to 97%
  • گزینه‌های سنتز

    EasyEdit
    SafeEdit
    cGMP/GMP-like

    ویژگی‌های خدمت

    نام سرویس Synthetic CRISPR sgRNA
    محصول شرکت GenScript Biotech
    پشتیبانی و هماهنگی BMG Biotech
    نحوه سفارش‌گذاری تکمیل فرم اولیه
    سایر خدمات کریسپر ورود به دسته‌بندی CRISPR
    زمان تحویل 3 تا 4 هفته
    ارائه محصول نهایی فیزیکی همراه با سرتیفیکت

    پروسه سفارش Synthetic CRISPR sgRNA در BMG

    ارسال اطلاعات

    در گام نخست، با مراجعه به این بخش، اطلاعات مربوط به پروژه خود را برای ما می‌فرستید؛ به این نحو که نوع یا انواع خدمت CRISPR را مشخص کرده و توضیحات مورد نظر خود را درج می‌نمایید.

    1
     

    هماهنگی و پرداخت

    پس از ارسال اطلاعات اولیه، نوبت به هماهنگی‌ها، استعلام و اطلاع‌رسانی از جزئیات پروسه خواهد رسید. در این مرحله کارشناسان ما گام به گام همراه با شما به پیش می‌روند.

    2
     

    سنتز سازه‌ها و تحویل

    پس از انجام هماهنگی‌‌ها و پرداخت وجه سفارش، عملیات سنتز یا خرید سازه‌های کریسپر توسط شرکت GenScript آغاز شده و محصول نهایی به‌صورت فیزیکی تحویل پژوهشگر می‌گردد.

    3

    مزیت‌های ما

    متمایز در قیمت و سرعت

    تمایز در کیفیت و قیمت

    دقیق‌ترین و سریع‌ترین سرویس

    بین المللی

    کارشناسان بین‌المللی

    امکانات نوین و فناوری‌های پیشرفته

    هدف

    رویکرد تخصصی

    حضور پژوهشگران بیوتکنولوژی

    گواهی

    گواهینامه‌ها

    GenScript ISO 9001, ISO 13485

    سوالات متداول

    چند توالی sgRNA یا crRNA برای Knock-out هدفمند نیاز است؟

    حداقل 3 توالی crRNA برای اطمینان از Knock-out و دقت تجربی توصیه می‌شود. استفاده از جهش‌های Knock-out به‌طور مستقل، از اثرات ناخواسته جلوگیری می‌شود.

    ●  تولید سریع‌تر: sgRNA مصنوعی در عرض سه روز کاری از طریق سنتز شیمیایی تولید می‌شود، درحالی‌که روش‌های سنتی زمان بیشتری نیاز دارند.

    ●  عدم ورود DNA خارجی: تحویل بدون DNA خارجی خطر ادغام تصادفی در ژنوم را کاهش می‌دهد.

    ●  شناسایی سریع: پس از انتقال، سطح بالایی از sgRNA در سلول قابل مشاهده است.

    ●  پاک‌سازی سریع‌تر از سلول: باعث کاهش اثرات ناخواسته می‌شود.

    ●  کارایی بالا: حتی در سلول‌های سخت‌تکثیر عملکرد مطلوبی دارد.

    ●  ظرفیت بسته‌بندی بالا: امکان سنتز تا 200 نوکلئوتید (nt).

    ●  سمیت کمتر: در مقایسه با gRNA تولیدشده از پلاسمید یا ویروس.

    در استفاده از sgRNA، نیازی به مرحله اتصال crRNA و tracrRNA قبل از استفاده نیست. مطالعات نشان داده‌اند که sgRNA از نظر پایداری و کارایی ویرایش ژن بهتر از ترکیب crRNA/tracrRNA عمل می‌کند.

    sgRNA ترانسکریپت‌شده در آزمایشگاه (IVT) توسط RNA پلیمراز فاژی تولید می‌شود و حاوی 5'-تری فسفات است که می‌تواند پاسخ ایمنی را در برخی سلول‌ها فعال کند. در مقابل، sgRNA مصنوعی فاقد این اصلاحات بوده و کارایی ویرایش بهتری دارد.

    sgRNA اصلاح‌شده دارای تغییرات 2'-O-methyl و فسفوروتیوات در سه رزیدوی انتهایی RNA است که باعث افزایش پایداری آن در برابر هیدرولیز و تخریب توسط نوکلئازها می‌شود.

    sgRNA می‌تواند به‌صورت لوله‌های تکی یا صفحات 96 چاهک، به‌صورت پودر خشک یا محلول در بافر TE (pH 8.0، 100 µM) یا آب بدون نوکلئاز تحویل داده شود.

    ما می‌توانیم sgRNA را تا طول 200 نوکلئوتید (nt) به‌صورت شیمیایی سنتز کنیم.

    بله، ما امکان تحویل sgRNA سنتز‌شده شیمیایی را به‌صورت آرایه‌بندی‌شده در صفحات 96 چاهک فراهم کرده‌ایم. هر چاهک می‌تواند شامل sgRNA سفارشی‌شده برای یک ژن خاص باشد.

    EasyEdit sgRNA: تصفیه‌شده با روش Desalt، تحویل سریع و مقرون‌به‌صرفه، مناسب برای غربالگری یا تحقیقات اولیه.

    SafeEdit sgRNA: تصفیه‌شده با HPLC که حداقل 90% خلوص را تضمین می‌کند، مناسب برای مراحل تأیید و توسعه.

    ● sgRNA پودری را در بافر TE با غلظت 100 پیکومول در میکرولیتر حل کنید.

    ●  آن را به قسمت‌های کوچک تقسیم کرده و در دمای منهای 20 درجه سانتیگراد نگهداری کنید.

    ●  از یخ‌زدایی و انجماد مکرر اجتناب کنید. برای ذخیره طولانی‌مدت، دمای منهای 80 درجه سانتیگراد توصیه می‌شود.

    بله، استفاده از کنترل‌های معتبر ضروری است. برخی از کنترل‌های رایج:

    ●  کنترل مثبت: برش ناحیه‌ای استاندارد و اثبات عملکرد صحیح سیستم.

    ●  کنترل منفی: بدون sgRNA برای بررسی تاثیرات غیرمستقیم.

    ●  کنترل ساختگی: برای بررسی کارایی و بهینه‌سازی شرایط.

    ●  پروتئین Cas9 برای برش DNA هدف.

    ●  توالی PAM (مانند NGG برای SpCas9).

    ●  الگوی HDR (در صورت نیاز) برای وارد کردن جهش‌ها یا درج‌های خاص.

    ●  مجموعه RNP بسته به نوع پروتئین Cas و شرایط نگهداری می‌تواند پایدار بماند.

    ●  در دمای منهای 20 یا منهای 80 درجه سانتیگراد ممکن است تا یک سال بدون بازدارنده RNase پایدار بماند.

    ●  توصیه می‌شود از RNP تازه استفاده شود و از یخ‌زدایی و انجماد مکرر خودداری کنید.

    • مجموع

    شناسه خدمت: Synthetic-CRISPR-sgRNA دسته:
    • کنترل کیفیت توسط کارشناسان بین‌المللی
    • ضمانت «اصالت» تمامی خدمات و محصولات
    • قیمت منصفانه با منشور حقوق مصرف‌کنندگان BMG
    • صرفه‌جویی در زمان شما با انجام فرایندهای سیستماتیک
    با خیال راحت از BMG Biotech خرید کنید!
    • پشتیبانی
    • نماد اعتماد الکترونیکی
    • پرداخت کارت به کارت
    • behparddakht
    • ssl secured

    با ما از جزئیات پروژه اهداف تحقیقاتی نیازهای آزمایشگاهی داده‌های پژوهشی برنامه‌ریزی زمانی چالش‌های علمی نتایج مورد انتظار خودتان بگویید!

    کارشناسان BMG از مراحل اولیه تا پروسۀ اجرایی و تحویل نهایی در کنار شما هستند.

    سبد خرید
    پیمایش به بالا